Cette vidéo démontre le développement de réseaux neuronaux issus de micro-tissus à l’aide d’une micro-colonne d’hydrogel avec un noyau de matrice extracellulaire. Les agrégats neuronaux ensemencés adhèrent, étendent les projections et forment des réseaux neuronaux structurés, contribuant ainsi aux progrès du neurodéveloppement et de la recherche neurothérapeutique.
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Développement d’un réseau neuronal issu d’une micro-ingénierie tissulaire à l’aide d’une micro-colonne à base d’hydrogel
August 7th, 2025
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Pipette sérologique jetable en polystyrène 14200075 Name Company Catalog Number Comments Découpeuse laser Universal laser systems PLS4.75 Utilisé pour fabriquer le moule à micro-canaux découpé au laser. Dispositif de fabrication de micro-colonnes découpé au laser Sur mesure -------------- Contactez notre groupe de recherche si vous êtes intéressé. Dimensions et plans fournis dans le manuscrit. Vis -------------- -------------- #4-40 avec un diamètre de filetage de 3,05 mm Écrous -------------- -------------- #4-40 avec un diamètre de filetage de 3,05 mm Aiguille d’acupuncture (180 μm de diamètre) Lhasa medical sj.16X40 Le diamètre peut être modifié en fonction de la taille souhaitée pour la lumière de la micro-colonne. Boîte de Pétri Fisher 08772B Saline tamponnée au phosphate de Dulbecco (DPBS) Invitrogen Fisher 13-678-11D Agarose Sigma A9539-50G Tube capillaire (398 μm de diamètre) Fisher 21170D Le diamètre peut être modifié en fonction de la taille souhaitée pour la coque de la micro-colonne. Plaque chauffante Fisher SP88857200 Barre magnétique Fisher 1451352 Micropipette Sigma Z683884-1EA Aiguille de calibre 25 mm Fisher 14-826-49 Microscalpel Roboz chirurgical RS-6270 Ciseaux Outils scientifiques fins14081-09 Instruments de précision Forceps World 501985 Stérilisateur à billes chaudes Sigma Z378550-1EA Stéréoscope Nikon SMZ800N Utilisé pour toutes les étapes de dissection et pour la fabrication de micro-TENN. Collagène de queue de rat de type I Corning 354236 Maintenir à 4 ºC et ne retirer qu’en cas de besoin. Utilisez de la glace pour préserver sa température lors de l’utilisation. Tube de microcentrifugation Fisher 02-681-256 Laminine de souris Corning 354232 Maintenir à 4 ºC et retirer uniquement lorsque nécessaire. Utilisez de la glace pour préserver sa température lors de l’utilisation. Milieu neurobasal Invitrogen 21103049 Milieu basal pour la culture de cellules neuronales prénatales et embryonnaires. Conserver à 4 °C et réchauffer à 37 °C avant utilisation. Hydroxyde de sodium (NaOH) Fisher SS2661 Acide chlorhydrique (HCl) Fisher SA48-1 Papier tournesol Fisher 09-876-18 Solution saline équilibrée de Hank (HBSS) Invitrogen 14170112 Conserver à 4 ºC. 0,25 % Trypsine-EDTA Invitrogen 25200056 Conserver à -20 ºC et réchauffer à 37 ºC avant utilisation. Déoxyribonucléase pancréatique bovine (DNase) I Sigma 10104159001 Se conserver à -20 ºC et à 37 ºC au chaud avant utilisation. Supplément B-27 Invitrogen 12587010 Supplément ajouté au milieu neurobasal pour la culture des neurones de l’hippocampe et de la corticole. Conserver à -20 ºC et réchauffer à 37 ºC avant utilisation. L-glutamine Invitrogen 35050061 Conserver à -20 ºC et réchauffer à 37 ºC avant utilisation. Sprague Dawley embryon jour 18 rats Charles River Souche 001 Pipette Pasteur Fisher 22-042816 Tube à centrifuger 15 mL EMESCO 1194-352099 Vortex Fisher 02-215-414 Centrifugeuse Fisher 05-413-115 Hémocytomètre Fisher 02-671-6 Imprimante 3D Objet30 Stratasys -------------- Utilisée pour fabriquer les moules pyramidaux à micro-puits. Moule à puits pyramidal imprimé en 3D Sur mesure -------------- Contactez notre groupe de recherche si vous êtes intéressé. Dimensions et plans fournis dans le manuscrit. Polydiméthylsiloxane (PDMS) et agent de durcissement Fisher NC9285739 Livré en kit avec élastomère et agent de durcissement. À utiliser à l’intérieur d’une hotte chimique. Entonnoir Fisher 10-348C 1 ml poire pipette Sigma Z509035 Micro-spatule Fisher S50821 Plaque de culture 12 puits EMESCO 1194-353043 Four Fisher 11-475-154 Incubateur Fisher 13 998 076 Microscope Eclipse Ti-S Nikon -------------- Utilisé pour la prise d’images en contraste de phase. Avec acquisition d’images numériques à l’aide d’un appareil photo QiClick interfacé avec le logiciel de recherche de base Nikon elements (4.10.01).
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